1、差异化蛋白提取

根据目标蛋白定位（细胞核/细胞浆/细胞膜）、蛋白特性（变性/非变性、可溶性/不溶性蛋白），匹配专属裂解液与提取方案；针对磷酸化蛋白、易降解蛋白添加蛋白酶/磷酸酶抑制剂，最大程度保留蛋白活性与完整性。

2、精准蛋白定量

统一采用BCA法/Bradford法双方法可选，精准测定样本总蛋白浓度，保证上样量均一，避免因上样误差导致数据失真，为后续半定量分析提供精准基础。

3、定制化配胶制胶

根据目标蛋白分子量大小，配置对应浓度分离胶与浓缩胶，小分子蛋白、大分子蛋白分区制胶，保证蛋白分离效果清晰、条带规整、无拖尾。

4、梯度电泳分离

依据蛋白分子量设置差异化电泳电压、电泳时间，分段稳压电泳，保证蛋白充分分离、条带均匀，解决小分子跑飞、大分子分离不完全等常见问题。

5、适配性转膜工艺

根据凝胶厚度、蛋白分子量、膜类型（PVDF/NC膜），精准匹配转膜电流与转膜时间，采用湿法标准转膜体系，保证大分子不转不全、小分子不穿膜，转膜效率稳定。

6、针对性封闭处理

根据蛋白特性、抗体属性灵活选择封闭体系：常规蛋白采用脱脂奶粉封闭，磷酸化蛋白、特异性敏感指标采用BSA封闭，有效阻断非特异性结合，降低背景杂带。

7、标准化抗体孵育洗膜

优化一抗稀释比例、4℃过夜恒温孵育，保证抗原抗体充分结合；严格规范TBS-T漂洗频次与时长，去除游离抗体残留；二抗室温精准孵育，严控浓度避免非特异性吸附。

8、ECL化学发光曝光成像

采用高灵敏度ECL发光液，梯度曝光、多次成像，筛选最优条带图片，保证弱表达蛋白可检出、强表达条带无过曝，成像清晰、数据可重复性强。

9、专业灰度数据分析

采用ImageJ专业软件灰度分析，以内参蛋白归一化校正，计算目标蛋白相对表达量，提供完整量化数据与差异分析依据。

三、一站式闭环服务流程

1.售前技术对接：专属技术人员一对一沟通，根据样本类型、蛋白指标、种属特性，定制专属WB实验方案，明确样本收集、保存、送检标准，解答抗体匹配、实验难点等问题。上海本地可上门取样，全国支持低温快递送检。

2.样本核验登记：实验室接收样本后双人核对样本编号、数量、检测指标、保存状态，对降解、量不足、保存不当样本第一时间反馈，避免无效实验。

3.全流程实验代测：资深实验人员全程操作，严格SOP执行，全程设置内参对照、空白对照，严控实验误差。

4.结果交付结算：实验完成后，客户结算费用，统一交付全套实验图片、原始数据、灰度分析结果、标准化实验报告。

5.售后技术答疑：永久提供数据解读、条带分析、实验优化、重复实验方案指导，协助论文图表制作与结果阐述。

四、客户送检须知（样本规范）

1、可检测样本类型

各类动物组织、细胞样本、菌体蛋白、纯化蛋白样本，适配人、大鼠、小鼠、兔、猪、牛羊等多种属样本检测。

2、最低样本用量标准

细胞样本：单指标最低细胞量 1×10⁶个/份；

组织样本：单指标最低组织重量 30mg/份，建议送检50–100mg，预留冗余便于研磨、重复实验。

3、标准样本保存方法

新鲜组织样本：取材后快速去除多余杂质，液氮速冻后置于-80℃冷冻保存，严禁常温放置、反复冻融，防止蛋白降解、修饰丢失。

悬浮细胞样本：收集细胞后预冷PBS清洗3次，彻底吸净残留培养基与废液，密封冻存。

贴壁细胞样本：弃培养基，预热PBS清洗；可胰酶消化或细胞刮收集（敏感蛋白优先细胞刮收集，避免胰酶破坏目标蛋白），冷PBS漂洗3次，吸干液体后冷冻保存。

4、送检前置告知信息

需提前告知：样本种属、样本数量、待测目的蛋白名称、蛋白分子量、是否为磷酸化/修饰蛋白、是否需要自备抗体或公司代购。

5、样本邮寄规范

采用泡沫保温箱+干冰/生物冰袋低温密封运输，优先顺丰、中通陆运快递；包裹内备注：样本编号、检测指标、联系方式、实验后样本是否寄回。

五、实验报告交付标准（可直接用于论文结题）

谷研实业交付全套完整合规实验资料，满足期刊投稿、课题结题、项目验收需求：

1.高清目的蛋白特异性条带曝光原图；

2.目的蛋白+内参蛋白完整配对成像图片；

3.ImageJ专业灰度分析原始数据、相对表达量化结果；

4.样本蛋白定量原始数据；

5.完整标准化实验报告（含实验原理、详细步骤、仪器参数、试剂信息、质控说明、结果分析）。

六、服务周期与收费标准

1、服务周期

样本验收合格后，常规指标 5–7个工作日 交付全套实验结果；多指标、大批量样本、疑难修饰蛋白可协商加急处理。

2、收费政策

凡采购上海谷研实业WB配套抗体、检测试剂盒，可享受对应指标代测服务；单独送检客户根据样本数量、检测指标难度、是否含蛋白提取、抗体代购等据实报价，所有收费与服务权责以双方合作合同为准。

七、质量保障体系

上海谷研实业搭建专业化蛋白免疫印迹实验平台，配备全套精密实验设备，团队拥有多年WB实操经验，熟练解决条带弱、无条带、背景高、杂带多、条带拖尾、过曝欠曝等各类实验问题。

全程标准化质控：批次内设置内参对照、空白对照，严格把控蛋白提取、上样、电泳、转膜、孵育全流程，保障实验数据客观、条带清晰、重复性优异。

温馨提示：我司严格规范实验操作，保障数据真实客观，但受样本质量、蛋白本底表达、抗体特异性等客观因素影响，不承诺固定表达结果。

八、售后服务保障

·全程一对一技术跟进，从样本准备到报告交付全程指导；

·报告交付后永久免费答疑，协助数据解读、论文图表优化、实验条件复盘；

·定期客户回访，持续优化实验质量与服务体验；

·所有服务条款、售后标准均以正式合作合同为依据，保障客户科研权益。

九、谷研WB代测核心优势

1、自营实验室，试剂+代测一体化，性价比远超纯外包机构；

2、购配套试剂/抗体享受代测服务，大幅节省科研经费；

3、擅长疑难蛋白、磷酸化修饰蛋白、低丰度蛋白检测，有效降低实验失败率；

4、个性化定制实验体系，拒绝流水线模板实验，条带清晰度、数据重复性更高；

5、上海本地上门取样，全国低温冷链收样，送检便捷高效；

6、交付资料齐全，原图、原始数据、灰度分析、完整报告一站式交付，直接适配SCI投稿与课题结题。