3004901493@qq.com 021-39596320
猪主动脉内皮细胞

猪主动脉内皮细胞

货号:
产品规格:
价格:
7,780.00
库存: 20
数量:
收藏: 0
产品概述 product description

细胞简介 猪主动脉内皮细胞分离自胸主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞,可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态,当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管疾病的发生。因此,主动脉内皮细胞已成为研究心血管疾病发病机制及治疗药物不可缺少的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞,由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至最小的微血管。

产品属性
产品名称 猪主动脉内皮细胞
组织来源 胸主动脉组织
默认种属 小香猪,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 猪主动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
猪主动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
质量检测 实验室分离的猪主动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
方法简介 实验室分离的猪主动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:M199 完全培养基(20% FBS+1% 青链霉素 + ECGS)、PBS、0.1%Ⅰ 型胶原酶、75% 酒精、肝素生理盐水。
2. 耗材器械:无菌手术器械、15mL 离心管、培养皿、细胞培养瓶、止血钳、动脉夹持钳、封口针管。
3. 准备新鲜离体猪胸主动脉,取材后低温转运,全程无菌操作。
二、取材与预处理
1. 屠宰后立即取胸主动脉,剔除外层脂肪与结缔组织,肝素生理盐水反复冲洗血管内腔冲净残血。
2. 血管两端用线结扎一端,另一端注入预冷 PBS 灌满血管腔,反复冲洗内腔 2~3 次,倒置沥干管内液体。
3. 血管外侧 75% 酒精擦拭消毒外壁,避免液体流入管腔损伤内皮单层。
三、细胞分离与消化
1. 向血管管腔内注入 0.1%Ⅰ 型胶原酶消化液,灌满后结扎另一端,37℃恒温水浴浸泡消化 15~20min。
2. 轻柔揉搓血管外壁促进内皮脱落,剪开结扎口,收集管内消化液,再用少量完全培养基冲洗血管内腔,合并全部液体。
3. 收集液体 1200r/min 离心 6min,弃上清,PBS 洗涤细胞沉淀 1 次。
四、纯化与接种培养
1. 完全培养基重悬细胞沉淀,接种于培养瓶,37℃培养箱静置培养。
2. 12h 后换液去除未贴壁细胞,后续每 2 天更换一次完全培养基;杂细胞极少,无需额外纯化。
3. 细胞铺满瓶底即可传代,CD31、vWF 因子鉴定内皮细胞,仅前 3 代细胞可用。