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猪脂肪间充质干细胞

猪脂肪间充质干细胞

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产品概述 product description

细胞简介 猪脂肪间充质干细胞分离自腹部腹股沟皮下白色脂肪;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织中也存在一些干细胞群,具有自我更新能力和多向分化潜能,被称为脂肪组织来源的间充质干细胞,简称脂肪间充质干细胞。与骨髓间充质干细胞相比,在来源、细胞群特点以及分化潜能等多方面极为相似。但是,脂肪间充质干细胞更易获得足够数量的细胞,且获取过程中对机体损伤更小,是更为理想的自体干细胞源。脂肪组织分离得到脂肪间充质干细胞以梭形为主要形态,BrdU可标记其细胞核。

产品属性
产品名称 猪脂肪间充质干细胞
简称 ADSCs;ADMSCs
组织来源 腹部腹股沟皮下白色脂肪
默认种属 小香猪,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 猪脂肪间充质干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
猪脂肪间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
质量检测 实验室分离的猪脂肪间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
方法简介 实验室分离的猪脂肪间充质干细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:LG-DMEM、10% 胎牛血清、双抗、0.1%Ⅰ 型胶原酶、红细胞裂解液、PBS。
2. 耗材:无菌离心管、培养瓶、滤网,取猪皮下白色脂肪组织。
3. 器械高压灭菌,裂解液室温备用。
二、取材与预处理
1. 无菌摘取猪腹部皮下脂肪,去除血管、筋膜、血块,PBS 反复冲洗 5 次。
2. 脂肪组织剪碎至糊状(<1mm³),加入 PBS 吹打静置,弃下层液体,重复漂洗至无明显血色。
三、细胞分离与消化
1. 脂肪组织按 1:2 体积加入胶原酶,37℃水浴摇床消化 60min,充分解离脂肪基质血管组分。
2. 加入完全培养基终止消化,1000rpm 离心 10min,分层后弃上层漂浮脂肪。
3. 沉淀加入红细胞裂解液室温裂解 5min,离心弃上清,PBS 洗涤细胞沉淀。
四、纯化与接种培养
1. 完全培养基重悬细胞,接种培养瓶,37℃培养箱孵育。
2. 48h 首次全量换液,去除未贴壁血细胞与杂细胞,之后每 3 天换液。
3. 细胞长至 90% 汇合按 1:3 传代,流式 CD29/CD44/CD45 鉴定间充质干细胞表型。