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大鼠肺微血管内皮细胞

大鼠肺微血管内皮细胞

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产品概述 product description

细胞简介 大鼠肺微血管内皮细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。

产品属性
产品名称 大鼠肺微血管内皮细胞
组织来源 肺组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25 / 5×10^5Cells/Vial
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 大鼠肺微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肺微血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
质量检测 实验室分离的大鼠肺微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
方法简介 实验室分离的大鼠肺微血管内皮细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:DMEM/F12 培养基、15% 胎牛血清、双抗、Ⅱ 型胶原酶、DNaseⅠ、无菌 PBS。
2. 器械:解剖套装、200/400 目细胞筛、离心管、培养瓶,超净台紫外灭菌。
3. 选用 4~6 周龄 SD 大鼠,术前器械高压灭菌。
二、取材与预处理
1. 大鼠麻醉处死后酒精消毒胸壁,开胸完整摘取双肺,PBS 反复冲洗肺组织至无血色。
2. 剔除气管、大支气管与肺门大血管,仅保留肺实质组织,剪碎为 1mm³ 组织糜,PBS 多次漂洗弃红细胞。
三、细胞分离与消化
1. 组织碎块加入含 DNaseⅠ 的 Ⅱ 型胶原酶消化液,37℃振荡消化 45min。
2. 培养基终止消化,双层筛网过滤收集单细胞悬液,离心弃上清。
3. PBS 重悬沉淀再次离心洗涤,去除消化酶与组织碎片。
四、纯化与接种培养
1. 细胞悬液接种培养瓶,差速贴壁 1h 去除成纤维细胞,转移上清至新培养瓶。
2. 培养 24h 首次换液,后续隔日换液,添加内皮生长添加剂提升细胞活性。
3. 细胞融合后消化传代,免疫组化 vWF 鉴定纯度,P1-P3 代用于实验。