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大鼠肺血管平滑肌细胞

大鼠肺血管平滑肌细胞

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产品概述 product description

细胞简介 大鼠肺血管平滑肌细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能:①细胞表面表达介质(ICAM-1和VCAM-1)参与血管壁炎症反应;②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化:①平滑肌增生易致肺动脉高压;②先天性肺动脉狭窄;③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素,最新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应,并且与血管疾病的发展及稳定性有关。

产品属性
产品名称 大鼠肺血管平滑肌细胞
组织来源 肺组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠肺血管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肺血管平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
质量检测 实验室分离的大鼠肺血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
方法简介 实验室分离的大鼠肺血管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:DMEM/F12、15% FBS、双抗、Ⅱ 型胶原酶、胰酶、无菌 PBS。
2. 器械:显微解剖镊、剪子、筛网、离心管,4 周龄 SD 大鼠。
3. 实验台面紫外灭菌,所有液体提前预热。
二、取材与预处理
1. 大鼠麻醉处死,消毒胸腔取肺,精细剥离各级肺血管,剥离干净肺实质。
2. 血管段 PBS 冲净内部血液,剪碎成组织碎末,预冷 PBS 多次漂洗。
三、细胞分离与消化
1. 胶原酶消化液 37℃消化 45~60min,期间间断吹打组织。
2. 培养基终止消化,过滤后离心收集细胞沉淀。
3. PBS 重悬洗涤一次,去除多余酶与组织碎屑。
四、纯化与接种培养
1. 细胞悬液接种培养瓶,差速贴壁 40min 去除内皮细胞,更换培养基继续培养。
2. 每 48h 换液一次,观察梭形平滑肌细胞克隆生长。
3. 传代后 α-SMA 染色鉴定,P1-P4 代用于后续诱导、给药实验。